Människokroppen innehåller ungefär nio gånger så många bakterieceller som mänskliga celler. Den renodlade mikrobiologins definition är en laboratoriekultur – till exempel i en petriskål – som bara innehåller en sorts bakterier. Det skulle vara omöjligt att avgöra vad som är en ren kultur och vad som är en kontaminerad kultur om man inte har en metod för att isolera någon art. När bakteriearten väl är isolerad kan du inkubera den självständigt i rena kulturer för att identifiera och karakterisera varje typ av organism.
Tänd bunsenbrännaren och sterilisera inokuleringsöglan genom att köra den genom den hetaste delen av lågan tills den lyser.
Vänta cirka 10 sekunder tills slingan svalnar och doppa den sedan i det mikrobiella provet .
Lyft täck på agarplattan och svep försiktigt inokuleringsöglan fram och tillbaka över ungefär en tredjedel av plattans yta. Sterilisera ympslingan i bunsenbrännarens låga igen.
Rör vid inokuleringen ögla till en oinokulerad del av agaren för att kyla ner den. Rotera agarplattan så att den inokulerade delen av plattan är till vänster eller höger, skjut sedan försiktigt inokuleringsöglan genom den inokulerade delen och över den oinokulerade övre tredjedelen av plattan flera gånger. Sterilisera om inokuleringsslingan.
Kyl ympslingan på en rengör delen av agarplattan och rotera plattan ytterligare 90 grader. Dra inokuleringsöglan genom den del som inokulerades i steg 4 och sedan fram och tillbaka över den återstående oinokulerade delen av plattan.
Inkubera plattan så länge det behövs för att synliga mikrobkolonier ska dyka upp. Detta kan vara 24 timmar, 48 timmar eller längre.
Sterilisera en ympslinga i en bunsenbrännarlåga. Rör den till en isolerad koloni på agarplattan. Dra den sedan över ytan av ett agarrör eller doppa det i näringsbuljong.
Låt agarröret eller näringsbuljongen inkubera. Den ska nu innehålla en ren kultur.
Saker du behöver
mikrobiellt prov
ympningsögla
Bunsen brännare
agarplatta
Tips
Processen att sprida mikroorganismer över en platta i etapper resulterar i en streckplatta. Varje på varandra följande region av streakplattan innehåller en lägre täthet av organismer, så var försiktig så att du inte korsar in i föregående region mer än en eller två gånger när du inokulerar.
Du kan inkubera mikrobiella kulturer vid rumstemperatur, men om du har tillgång till laboratorieinkubatorer kan du kontrollera villkoren för att skapa kulturer och sedan identifiera vilka förhållanden som är optimala för dina rena kulturer.
Varningar
Särskilt när du har att göra med okända organismer, överväg säkerheten som första prioritet: använd handskar, sterilisera ytor efter att du har exponerat dem till bakterier och var noga med att sterilisera din ympslinga före och efter varje steg.